长链非编码RNA ZFAS1和SNHG5在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响分析

目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)锌指蛋白反义链1(zinc?nger antisense 1,ZFAS1和核仁小RNA宿主基因5(small nucleolar RNA host gene 5,SNHG5)在鼻咽癌组织中的表达及对预后的影响。方法选择2013年6月至2015年6月本院收治的109例鼻咽癌患者为研究对象,所有患者均行鼻咽活检且经病理检查证实为鼻咽癌。采用实时定量PCR和荧光定量PCR检测并比较鼻咽癌组织、癌旁组织以及不同临床病理特征、不同预后患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量。结果鼻咽癌组织中ZFAS1的相对表达量显著高于癌旁组织(P <0.05),而SNHG5的相对表达量显著低于癌旁组织(P <0.05)。不同性别、年龄患者ZFAS1和SNHG5的相对表达量比较均无显著差异(P_均> 0.05)。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者ZFAS1的相对表达量显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者ZFAS1的相对表达量显著高于无淋巴结转移患者(P <0.05);TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者SNHG5的相对表达量显著低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P <0.05),有淋巴结转移患者SNHG5的相对表达量显著低于无淋巴结转移患者(P <0.05)。107例患者完成随访,随访率为98.17%。随访3年,死亡19例,存活90例。死亡患者ZFAS1的相对表达量显著高于存活患者(P <0.05),且SNHG5的相对表达量显著低于存活患者(P <0.05)。结论在鼻咽癌组织中,lncRNA ZFAS1表达上调,且预后越差,其表达水平越高;lncRNA SNHG5表达下调,且预后越差,其表达水平越低。lncRNA ZFAS1和SNHG5在评估鼻咽癌预后方面具有重要的研究意义。     

胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达的临床意义

目的：探讨胃癌患者根治术后腹腔冲洗液中CEA mRNA表达情况及其临床意义。方法: 回顾性分析了2013 年1 月至2017 年12 月在南京大学医学院附属鼓楼医院接受胃癌根治切除术后进行腹腔灌洗液CEA mRNA检测的139 名患者的病历资料，并进行术后常规随访。用RT-PCR检测139 胃癌患者根治术后腹腔灌洗液中CEA mRNA表达情况。卡方检验分析腹腔灌洗液中CEA mRNA表达与临床基本特征、组织病理学资料、血液学指标及复发方式之间的关系。采用Logistic 单因素及多因素回归分析筛查影响CEA mRNA表达水平的因素。结果：139 名患者中44 名（31.7%）患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性。分析显示，胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达与性别、年龄、病理分级、Lauren 分型和HER2、EGFR、VEGFR等标记物间均没有明显的关联（均P>0.05），与病理类型、脉管是否侵犯、局部浸润深度、淋巴结转移程度和临床AJCC 分期有明显的关联（均P<0.05）。CEA mRNA阳性患者腹膜复发率明显高于阴性患者（P=0.012）。Logistic 单因素回归分析显示，印戒细胞癌（P=0.04，HR=2.810，95% CI: 1.050~7.520）、T 分期（P=0.016，HR=6.329，95% CI: 1.417~28.264）、N 分期（P=0.022，HR=3.068，95% CI: 1.172~8.027）、AJCC分期（P=0.016 ，HR=3.971 ，95% CI: 1.295~12.173 ）、神经侵犯（P=0.002 ，HR=6.738，95% CI: 1.995~22.757）、脉管侵犯（P<0.001，HR=16.36，95% CI: 3.85~69.512）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的危险因素。Logistic 多因素回归分析显示，经过对其他因素的校正，脉管侵犯（P<0.001，HR=21.314，95% CI: 4.21~107.907）为胃癌患者腹腔灌洗液CEA mRNA阳性表达的独立危险因素。结论：胃癌腹腔灌洗CEA mRNA阳性的患者腹膜复发转移风险高且预后不良，应考虑包括腹腔局部治疗在内的更加积极的抗肿瘤治疗。     

反义导向分子a在单一延长应激模型大鼠皮质中的表达及意义

目的探讨反义导向分子a(Repulsive guidance molecule a,RGMa)在创伤后应激障碍模型单一延长应激模型大鼠皮质中的表达及意义。方法随机将30只Wistar大鼠分为对照组(con)、单一延长应激模型组(model)。建模后第7d观察两组大鼠行为学改变,并采用免疫荧光、逆转录PCR检测两组大鼠皮质RGMa的表达改变。结果与正常对照组比较,模型组大鼠僵立行为明显增加(0.01),皮质RGMa蛋白及m RNA表达水平均显著增多(0.01)。结论单一延长刺激诱导大鼠皮质RGMa蛋白及转录水平上调,可能是引起PTSD皮质体积缩小的重要分子机制之一。     

氯化铝染毒对大鼠海马APP基因甲基化的影响

目的观察氯化铝(AlCl_3)对大鼠海马淀粉样前体蛋白(APP)启动子区甲基化及β淀粉样蛋白(Aβ)含量的影响。方法健康6月龄雄性SPF级SD大鼠40只,分成4组(正常对照组和AlCl_3低、中、高剂量组),每组10只,各组分别腹腔注射AlCl_30、10、20和30 mg/kg组,正常对照组注射相应体积生理盐水,连续5天,休息2天,共8周。甲基化特异性PCR法(MSP)检测海马APP启动子区的甲基化状态,实时荧光定量PCR(RT-PCR)测定APP mRNA表达水平,ELISA法测APP、Aβ_(42)蛋白表达量。结果随着AlCl_3浓度的增加,大鼠平均逃避潜伏期明显延长(P0.05),AlCl_3中、高剂量组穿越平台的次数明显减少(P0.05);AlCl_3染毒组海马APP启动子区甲基化检出率降低(χ~2=27.61,P0.05),其中,高剂量组APP甲基化的检出率低于其余3组(P0.01),APP甲基化的检出率随AlCl_3染毒剂量增加而降低的趋势(趋势χ~2=19.08,P0.01)。各AlCl_3染毒组APP mRNA的表达水平高于生理盐水组(F=8.973,P0.05)。与正常对照组比较,各AlCl_3染毒组大鼠海马APP、Aβ_(42)蛋白浓度均增高(F=11.14,P=0.032;F=17.82,P=0.018)。与低剂量组相比,中剂量组APP蛋白表达量增加,高剂量组APP、Aβ_(42)蛋白表达量增加,差异均有统计学意义(P0.05)。Aβ_(42)蛋白免疫组化法检测结果示,中、高剂量组海马神经细胞内外出现棕黄色物质,考虑有Aβ的沉积。结论氯化铝染毒可引起大鼠海马APP启动子甲基化水平降低,进而影响APP mRNA表达水平增高,海马组织APP表达量增多,从而导致Aβ产生增多而沉积。     

HPV E6/E7mRNA联合TCT检测对宫颈癌早期病变筛查诊断效能的影响

目的探究HPV E6/E7mRNA联合薄层液基细胞学检查(TCT)检测对宫颈癌早期病变筛查诊断效能的影响。方法选取238例宫颈病变患者,均行HPVE6/E7mRNA、TCT检测,以阴道镜下组织活检为金标准。对比HPVE6/E7mRNA、TCT检测宫颈病变阳性率及HPVE6/E7mRNA、TCT单独及联合检测灵敏度、特异度。结果HPVE6/E7mRNA、TCT检测宫颈病变阳性表达率随病变程度增加而增加(P0.05);对于宫颈病变,HPVE6/E7mRNA检测特异度较TCT检测高,灵敏度较TCT检测低(P0.05);HPVE6/E7mRNA、TCT联合检测灵敏度、特异度高于单独检测(P0.05)。结论 HPVE6/E7mRNA、TCT联合应用于宫颈癌早期病变筛查,可提高诊断灵敏度、特异度,为诊断提供更多参考依据,具有较高的应用价值。     

AFP mRNA检验对胃癌患者术后肿瘤复发转移及预后的预测价值

目的探讨胃癌患者术前外周血甲胎蛋白信使核糖核酸(AFP mRNA)检验对术后复发转移及预后的预测价值。方法选取2009年1月至2012年6月我院收治的胃癌手术患者100例,所有患者术前1 d取外周静脉血采用反转录·聚合酶链反应(RT-PCR)检测AFP mRNA,按照检测结果分为AFP mRNA阴性组(n=58)和AFP mRNA阳性组(n=42)。术后随访3年,观察并对比两组的术后1、2、3年复发转移率。采用Kaplan-Meier法计算两的总体生存率(OS)和无病生存率(DFS),两组间比较Log-rank法。采用COX回归模型分析AFP mRNA阳性是否为胃癌手术患者预后的独立影响因素。结果 AFP mRNA阳性组术后1、2、3年肿瘤复发率分别为57.1%(24/42)、76.2%(32/42)、100.0%(42/42);AFP mRNA阴性组分别为20.7%(12/58)、41.4%(24/58)、69.0%(40/58),AFP mRNA阳性组术后3年有14.3%(6/42)发生肺转移,AFP mRNA阴性组术后3年无远处转移,AFP mRNA阳性组术后1、2、3年复发率和转移率均明显高于AFP mRNA阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05);AFP mRNA阳性组术后1、2、3年OS分别为(90.1%、31.6%、10.2%);1、2、3年DFS分别为(72.3%、22.1%、5.4%);AFP mRNA阴性组分别为(100.0%、72.4%、25.0%)和(88.5%、52.5%、13.5%);AFP mRNA阴性组术后1、2、3年OS和DFS均明显高于AFP mRNA阳性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。COX回归分析结果显示:AFP mRNA阳性是胃癌手术患者预后的独立影响因素(OR=3.294,95%CI 1.895~6.423,P=0.001)。结论术前外周血AFP mRNA阳性的胃癌患者术后更易发生复发转移,预后相对较差。